光学显微镜的基础知识

　　显微镜术语　普通光学显微镜的基本工作原理是利用物镜和目镜的多组凸透镜将物像逐级放大并反射到视网膜上的过程。而显微镜的性能和质量的高低可通过分辨率、数值孔径、总放大倍率等指标来反映。

　　(1)分辨率：衡量光学系统分辨相隔微小距离的两个点能力的指标，即“能够分辨两点之间最小距离的能力”，称之为光学系统的分辨率。一个光学系统它所能分辨的两点之间的距离愈小，分辨率也就越高。

　　(2)数值孔径：数值孔径(N.A.)是决定物镜和聚光镜性能的一个重要参数。用下式表示：

　　这里n是在物镜、透镜和聚光镜与标本之间的一种介质(空气、浸油等)的折射率，而α则是孔径角的一半。数值孔径越大，图像就越明亮，分辨率越高。

　　(3)总放大倍率：显微镜的总放大倍率=单个物镜的放大倍率×目镜的放大倍率。

　　(4)光学筒长：是指从观察筒下端的结像透镜到插入目镜处的镜筒顶端的长度。

　　(5)工作距离：指当一个标本图像被清晰聚焦时，从物镜的前端到盖玻片的上表面的距离。通常，物镜的放大倍率越高，其工作距离便越短。

　　(6)物方视场：是指标本在显微镜下实际能被观察到圆形区域的直径(mm)。

　　(7)景深：指在对标本某一断面聚焦的状态下，该面前后同时能被看清的景物范围(深度)。物镜的N.A.值(数值孔径)越大，景深越浅。