气相色谱法测珍珠滴丸中冰片含量及稳定性研究

　　【摘要】目的：建立气相色谱测定珍珠滴丸中冰片含量的方法，并用该方法对制剂中冰片的稳定性进行研究。方法：以FFAP大口径石英毛细管柱(30m×0.53mm，0.5μm)为色谱柱，高纯氮气(99.999%)为载气;柱前压20kPa，柱温130℃，进样口温度220℃，氢火焰离子化检测器温度250℃;氢气(99.99%)流量为40ml/min，空气流量为400ml/min。结果：龙脑在0.25～0.75g/L线性关系良好，r=0.9999，加样回收率为99.33%,RSD为1.4%。结论：气相色谱法可作为珍珠滴丸的质量控制方法;制剂中冰片在30℃以下放置基本稳定，应避免高温环境。

　　【关键词】珍珠;冰片;色谱法，气相;珍珠滴丸

　　珍珠滴丸是在传统民间验方基础上，采用现代大孔树脂分离技术和滴丸制剂技术研制开发的作用迅速、质量稳定且可控的中药新药，临床用于治疗复发性口腔溃疡[1]。本方由羊耳菊、珍珠、冰片等药味组成，具有辛散苦泻、清热凉血、止痛等作用。其中冰片为合成龙脑，主要含龙脑、异龙脑[2]。中医认为冰片味辛、苦，归心、脾、肺经，有开窍醒神、清热止痛、生肌之功。现代医学研究表明，冰片具有抗菌、抗炎、止痛的功效。为控制产品质量，保证临床疗效，2006年3月以来以龙脑为指标，对珍珠滴丸中的冰片含量测定进行研究，为制剂质量评价及稳定性研究提供依据。

　　1仪器与试药

　　岛津GC-14B气相色谱仪，氢火焰离子化检测器;龙脑对照品(中国药品生物制品检定所，含量：89.1%，批号：881-200001)。

　　2方法与结果

　　2.1色谱条件色谱柱为FFAP大口径石英毛细管柱(30m×0.53mm，0.5μm)，载气为高纯氮气(99.999%)，柱前压20kPa，柱温为130℃，进样口温度220℃，检测器温度250℃;氢气(99.99%)流量为40ml/min;空气流量为400ml/min，进样0.5μl[3]。

　　2.2内标液制备取水杨酸甲酯适量，精密称定，用70%乙醇制成0.8g/L的内标液[4]。

　　2.3对照品溶液的制备取龙脑对照品适量，精密称定，加内标液制成1.25g/L，作为对照品储备液。

　　2.4供试品溶液的制备取本品0.5g，精密称定，置25ml量瓶中，加内标液适量，超声处理10min，放冷，用内标液稀释至刻度，摇匀即得。

　　2.5系统适用性试验分别吸取龙脑对照品溶液、制剂供试品溶液和不含冰片的阴性对照液各0.5μl注入气相色谱仪，记录色谱。从图1中可见，龙脑的保留时间约为4.1min，内标物(水杨酸甲酯)的保留时间约为5.4min，在本试验条件下龙脑、内标物与其他组分峰的分离度均大于1.5，阴性对照不干扰测定。

　　2.6线性关系考察精密吸取对照品储备液1、1.5、2、2.5、3ml置5ml量瓶中，加内标液稀释至刻度，摇匀，分别吸取上述系列溶液0.5μl注入气相色谱仪中，测定。以龙脑和内标物峰面积比值为纵坐标，进样浓度为横坐标，计算线性为Y=1.709X-8.2×10-4，r=0.9999，线性范围为0.25～0.75g/L。

　　2.7稳定性实验取供试品，按2.4制备供试液，在0、1、2、4、8h分别进样，测定峰面积，平均峰面积比(龙脑峰面积/内标峰面积)的RSD为1.3%，表明供试品溶液中龙脑在8h内稳定。

　　2.8重复性实验取供试品，按2.4法制备5份供试液，分别进样，测定。结果龙脑的平均含量为2.548%，RSD为1.4%。

　　2.9精密度实验取供试品，按2.4法制备供试液，分别进样5次，测定峰面积，平均峰面积比值的RSD为0.95%。

　　2.10加样回收率实验精密称取已测定龙脑含量的制剂(平均含量2.548%)9份，分别精密加入龙脑对照品适量，按2.4法制备供试液，分别进样，测定，计算回收率，结果见表1。表1制剂供试品中龙脑的回收率试验结果(略)

　　2.11样品含量测定按制剂供试液方法制备供试液和对照品溶液，分别进样测定。3批样品中龙脑的含量测定结果见表2。表23批试样品中龙脑含量测定结果(略)注：A:室温留样龙脑含量变化;B:30℃加速试验龙脑含量变化;C:40℃加速试验龙脑含量变化

　　2.12制剂中冰片稳定性考察[5]为考察制剂中冰片的稳定性，取上市包装样品，分别置室温(30±2)℃、(65±5)%RH和(40±2)℃、(75±5)%RH下放置，以制剂中龙脑含量为指标，考察冰片的稳定性，结果见图2。

　　从图2结果可见，制剂中龙脑在室温和30℃下放置12个月基本稳定，高温下放置不稳定。因此制剂存放应尽量避免高温环境。

　　3讨论

　　色谱柱是气相色谱分离的关键。我们曾用填充柱进行测定，结果柱效较差，分离时间较长。以FFAP采用大口径毛细管柱对冰片进行分离，结果柱效高，分离度好，龙脑、异龙脑和内标物峰完全达到基线分离，是测定冰片较为理想的色谱柱。冰片具有挥发性，如贮存环境不当，易造成损失[6]。珍珠滴丸的稳定性研究表明，在常温密闭包装条件下，珍珠滴丸中的冰片在室温条件下一年内基本稳定。珍珠滴丸中的冰片采用超声提取，简化了制备样品的方法，提高了分析的速度，并且辅料及其它干扰少，提取率高，可用于气相色谱测定。该方法简便易行，灵敏度高，重现性好，回收率高，可作为本品的质量控制指标之一。

　　【参考文献】

　　[1]马琳，王永林，王爱民，等.珍珠滴丸药效学及急性毒性实验研究[J].中外健康方摘：医药月刊，2007(8)：55.

　　[2]张贵君.现代实用中药鉴别技术[M].北京：人民卫生出版社，2000：306.

　　[3]王爱民，黄勇，王永林，等.大口径毛吸管柱气相色谱法测定菊黄上清含片中龙脑的含量[J].中国中药杂志，2006(2)：159.

　　[4]朱小红，孟新芳，刘芳，等.气相色谱法测定吲哚美辛三七冰片栓中冰片的含量[J].药物分析杂志，2006(11)：1615.

　　[5]国家药典委员会.中华人民共和国药典2005年版(二部)[S].北京：化学工业出版社，2005：附录176.

　　[6]黄卫东.冰片的研究进展[J].中国药业，2008(4)：64