普通生物显微镜的使用

[2011/5/28]

  一、显微镜的使用方法

  ㈠准备工作:首先将显微镜的工作台擦干净,然后将要观察的标本和各种器具准备好。

  ㈡显微镜的使用

  ⒈取用:将显微镜从镜箱取出,取出时一手握镜臂,一手托底座将其轻放在离工作台边缘8-10厘米处,偏左的位置。

  ⒉低倍镜的使用

  ⑴对光:对光前,先安上合适的目镜(一般采用10×目镜),将10×、40×、100×物镜按照顺时针安在物镜转换器上,逆时针转动转换器使10×物镜对准载物台中央的通光孔。从目镜中观察,同时调节反光镜或接通电源,直至视场明亮、均匀为止。

  使用双目显微镜对双目镜宽度要进行调节,用推或拉的方法调节两目镜之间的距离,直到在两个目镜上双眼同时观察时,两个图形的视场正好完全重合,此时镜筒刻度盘上所示的数字,就是观察者两眼瞳孔之间的距离。

  根据物镜的放大倍数调节聚光镜的高度,使用油镜时由于放大倍数大,镜像亮度小,需要较强的照明,需要将聚光镜升至最高处。

  调节可变光阑(光圈)使聚光镜的镜口率与物镜的镜口率一致,才能充分发挥舞静的分辨率,方法为:将显微镜调整到工作状态后,从目镜筒中拔出目镜,一边观察(向拔出目镜的目镜筒里看),一边缩小光阑,这时可看到缩小的光阑被物镜成的像,然后逐渐调大光阑,当光阑像的边缘与物镜通光孔黑圈的边缘一致时停止,这时的聚光镜镜口率与物镜镜口率就一致了。如显微镜可变光阑圆框上刻有表示口径的标尺,可调至物镜镜口率的80%,即物镜镜口率为0.65,则可变光阑的标尺调至0.65×80%=0.52即可。

  ⑵观察:将标本放置在载物台上,使标本对准通光孔正中,下降镜筒或升高载物台,并从侧面观察,使物镜下端和标本逐渐接近,但不能碰到盖玻片。从目镜观察,用粗准焦螺旋慢慢升起镜筒和下降载物台直到看到标本为至,再调节细准焦螺旋至物像清晰。

  ⒊高倍镜的观察

  在低倍镜下,找到要进一步观察的部位,移至视野中心,再上升聚光镜、逆时针转动物镜转换器换上高倍镜。合格的显微镜操作距离是由低倍镜转换到高倍镜时刚好合用的,一般稍为调节一下细准焦螺旋即可看到清晰的物像。

  ⒋油镜的观察

  在高倍镜下看到标本后,把需要进一步放大的部位移至视野中心。上升镜筒或下降载物台约1.5厘米。将物镜转离光轴,在盖玻片所要观察的部位上滴一滴香柏油,把光阑升至最大。换上油镜,小心调节粗准焦螺旋,使油镜慢慢下降或慢慢上升载物台,从侧面观察油镜下端与标本之间的距离,当油镜的下端开始触及油滴时即可停止。从目镜观察,调节细准焦螺旋,直至看清标本物像。

  观察完毕,上升镜筒或下降载物台,将油镜转离光轴,用干的擦鏡纸轻轻地吸掉油镜和盖玻片上的油,再用浸湿二甲苯的擦鏡纸擦拭两三次,最后用干净的擦鏡纸再擦拭两三次。

  ㈢观察后的处理工作

  清洁:显微镜上的污物(残物或灰尘),用擦鏡纸擦干净,若擦不干净可蘸少许二甲苯进行擦拭。

  显微镜各部分的放置:擦完后,把物镜转离光轴,把反光镜转到与载物台垂直的方向,以减少灰尘粘落上面,而后罩上鏡套,小心的放回鏡箱内,保存备用。

  二、使用显微镜时应注意的事项

  ⒈取放时动作一定要轻,切忌震动和暴力,否则会造成光轴偏斜而影响观察,而且光学玻璃也容易损坏。

  ⒉由于物镜的螺丝口容易损伤,安装物镜时要特别小心,即先向左方倒转一小段,凹凸双方吻合后再向右方旋转,不要转的太紧,轻轻捻到头,再稍紧即可。

  ⒊鏡检标本应严格按照操作程序进行,观察时要从低倍镜开始,看清标本后再转用高倍镜、油镜。

  ⒋使用油镜时一定要在盖玻片上滴油后才能使用。油镜使用完后,应立即将镜头、盖玻片上的油擦干净,否则干后不易擦去,以致损伤镜头和标本。但应注意二甲苯用量不可过多,否则,物镜中的树胶溶解,透镜歪斜甚至脱落,盖玻片移动甚至连同标本一起融掉。

  ⒌使用时不可用手摸光学玻璃部分,如需擦拭应严格按照光学部件擦拭办法。

  ⒍使用的盖玻片和载玻片不能过厚或过薄。标准的盖玻片为0.17±0.02毫米,载玻片为1.1±0.04毫米。过厚或过薄将会影响显微镜成像及观察。

  三、生物显微镜的擦拭和保养

  ㈠擦拭

  ⒈光学部分的擦拭

  顺序:吸耳球吹――毛笔、刷子和羽毛轻刷――擦鏡纸轻擦——擦鏡纸蘸二甲苯轻擦。

  镜头表面发霉和发雾可用擦鏡纸蘸少量酒精乙醚混合液(3:7)轻擦。内表面发霉和发雾,一般无法清除,所以严防发生。

  ⒉机械部分的擦拭

  用干净的软布擦拭,或用擦鏡纸蘸二甲苯轻擦,不得用酒精和乙醚,因为这些试剂会侵蚀油漆,容易把油漆擦掉。

  ㈡保养

  防潮、防尘、防腐蚀、放热