液相色谱仪测定肉类食品中瘦肉精残留量

　　摘要

　　瘦肉精是一种动物用药，将瘦肉精添加于饲料中，可以增加动物的瘦肉量、减少饲料使用、使肉品提早上市、降低成本。近期，国内双汇火腿肠出现食品安全问题所引发的“瘦肉精”事件令国人对食品安全颇为堪忧，因此,对动物肉类或内脏中盐酸克伦特罗的监督检测显得十分必要。探讨肉类样品中瘦肉精(盐酸克伦特罗)的前处理方法,了解本市肉品中盐酸克伦特罗的残留情况。用水提取肉品中盐酸克伦特罗残留量,我们用固相萃取法对肉类样品提取液进行净化和浓缩,可以有效去除干扰,简便,灵敏度高,适于在日常检测工作中推广使用。残留监测作为食品安全的重要课题。使之越来越广泛地应用于不同类型兽药、农药及毒素类有毒有害物质的检测分析之中。

　　1.液相色谱仪测定肉类食品中瘦肉精残留量应用范围

　　本方法的检测思路可供食品中农药、兽药残留检测的借鉴。如兽药残留动物源食品中硝基呋喃类残留(呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因、呋马唑酮)磺胺类药物残留(磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺喹嚼啉)喹诺酮类(嚼喹酸、萘啶酸)氯羟吡啶、莫能菌素和盐霉素、乙氧酰胺苯甲酯、氯霉素、伊维菌素、克伦特罗、尼卡巴嗪、土霉素、四环素、金霉素(国标GBT14931.1)阿莫西林、盘尼西林及喹乙醇等。农药残留氨基甲酸酯农药、有机磷农药、百草枯、杀草快、草甘膦及氨基膦酸、苯并眯唑类杀菌剂、利谷隆、灭草隆及敌草隆、三嗪类多种农药的检测。

　　2.液相色谱仪测定肉类食品中瘦肉精残留量实验步骤

　　(1)仪器和设备

　　①高效液相色谱仪整套配置如下

　　宝石恒流泵1台紫外检测器1台六通进样阀1只色谱工作站1套

　　②匀浆机③旋转蒸发仪④电子天平：0.01mg⑤紫外分光光度计

　　⑥离心机⑦固相萃取仪⑧固相小柱

　　(2)试剂

　　①盐酸克伦特罗标准品②乙醚;分析纯③正己烷：分析纯④甲醇：色谱纯

　　⑤盐酸克伦特罗标准液⑥lmol/I。盐酸溶液⑦0.05mol/L乙酸缓冲液

　　⑧0.3mol/L乙酸缓冲液⑨lmol/LNaOH溶液’

　　⑩甲醇液：甲醇—重蒸水(75 25)

　　(2)仪器和设备

　　②匀浆机③旋转蒸发仪④电子天平：0.01mg⑤紫外分光光度计

　　⑥离心机⑦固相萃取仪⑧固相小柱

　　(3)测定步骤

　　①提取和净化取组织样品10g，加入30mllmol/L盐酸溶液匀浆，超声波振荡3h，5000r/mln的速度离心10min，—上清液用lmo]/LNaOH溶液滴至碱性，乙醚或正已烷抽三3次，抽提液在水浴锅上蒸发至5ml后上Silioa小柱，以除去大部分杂质，洗脱液上Alu—minaA小柱，将待测成分吸附在小柱上，用0.05mol几乙酸缓冲液(pH7.0)洗涤小柱3次，o.3mol/L乙酸缓冲液洗脱待测成分，冷冻干燥，用0.5ml甲醇液溶解后取100uL供高效液相色谱仪检测。

　　②测定

　　a.色谱条件

　　色谱柱：C18柱，250mmX4.6mm

　　流动相：甲醇—水(75 25)

　　流速：0.65ml/mill

　　检测波长：243nm

　　进样量：100uL

　　b.色谱测定分析样品按上述仪器操作条件供高效液相色谱仪分析。

　　③空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。

　　(4)检测限和回收率

　　本方法在猪的肌肉和肝脏组织中的检测限为0.001ug/g’回收率范围为80%±20%