茶叶中有机氯农药残留检测法――气相色谱

　　六六六、DDT均系有机氯农药,化学性质稳定,难易降解,易通过食物链在人体蓄积,具有慢性和潜在性的毒性作用,虽然在1987年已经禁止使用此类农药,但至今仍有检出。传统的方法采用填充柱恒温操作,低沸点组分解易重叠,高沸点组分峰易扩展,分离效果不理想。

　　研究毛细管柱在程序升温条件下测定茶叶中六六六、滴滴涕农药残留的最佳条件,探索测定有机氯农药残留的方法。方法：采用电子捕获-气相色谱法(ECD-GC)OV-17中等极性毛细管柱。程序升温起始温度185℃,10min后,以5℃/min速率升至230℃,保持15min,进样器温度220℃、检测器温度260℃。结果：在0.002～0.02ug/ml范围内呈良好的线形关系。六六六4个异构体(α-HCH、γ-HCH、β-HCH、δ-HCH)相关系数分别为0.9993、0.9999、0.9998、0.9999)DDT4个异构体的相关系数(P,P’-DDE、O,P’-DDT、P,P’-DDD、P,P’-DDT)为0.9990、0.9993、0.9991、0.9974。其相对标准偏差RSD(%)分别为1.4%～3.0%,回收率为94.8%～108.0%。结论：本法准确、可靠,适用于各类食品中六六六、DDT残留量的测定。

　　【关键词】毛细管柱;程序升温;有机氯

　　本文采用毛细管柱,程序升温操作,组分分离完全,分辩率高,精密度、准确度高,适应于各类食品中有机氯农药残留量的分析。

　　1方法

　　1.1主要仪器与试剂

　　1.1.1带电子捕获检测器的GC-9790气相色谱及数据处理工作站(浙江大学)。

　　1.1.2色谱柱30M×0.25MM×0.25umOV-17石英毛细管色谱柱。

　　1.1.3农药标准品六六六(α-HCH、γ-HCH、β-HCH、δ-HCH)纯度>99%各单体标准物。DDT(P,P’-DDE、O,P’-DDT、P,P’-DDD、P,P’-DDT)纯度>99%各单体标准物。

　　1.1.4农药混合标准使用液六六六、滴滴涕8个异构体配置成浓度为0.02ug/ml。

　　1.2试验方法

　　1.2.1原理试验中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相色谱法测定,与标准比较定量。电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有极高的灵敏度,利用这一特点,可分别测出痕量的六六六、滴滴涕。不同异构体和代谢物可同时分别测定。

　　1.2.2样品处理(1)提取:将粉碎混匀样品准确称取5.0g于250ml具塞三角瓶中,加入50ml醚,浸泡过夜(以浸过茶叶为宜,可适当增加石油醚用量)过滤,并用石油醚洗涤残渣数次,每次约5ml,合并滤液。(2)净化:将分液漏斗中石油醚提取液,以每次10ml浓硫酸磺化数次,直至上下层溶液都呈无色透明,弃去酸液上层分别用100ml2%硫酸钠溶液洗涤,弃去水相,石油醚层用盛有无水硫酸钠漏斗过滤,浓缩,最后定容至5.0ml容量瓶中,供气相色谱分析。

　　1.2.3色谱条件柱温起始温度185℃,10min后,按每分钟5℃/min速率升至230℃,保持15min;气化室温度220℃、检测器温度260℃;载气流速:高纯氮3℃/min,进样量1.0ul。

　　2结果与讨论

　　2.1色谱图按上述色谱条件,待仪器稳定后,进1.0ul标准溶液。程序升温25min内完成分离所得的分析图谱。

　　出峰顺序:8种农药1、2、3、4为α-666、γ-666、β-666、δ-666;5、6、7、8为P,P’-DDE、O,P’-DDT、P,P’-DDD、P,P’-DDT。

　　2.2标准曲线、线性范围及检出限将六六六,滴滴涕标准溶液稀释成不同浓度,进1.0ul,记录峰面积,绘制标准曲线。结果六六六、滴滴涕在0.0002ug/ml-0.020ug/ml范围内呈良好的线性关系。

　　本法检出限在取样量5g,最终体积为5ml。进样体积为1ul时,α-HCH、γ-HCH、β-HCH、δ-HCH依次为0.010、0.04、0.012、0.018ug/kg;P,P’-DDE、O,P’-DDT、P,P’-DDD、P,P’-DDT依次为0.058、0.125、0.450、0.525ug/kg。

　　2.3最佳色谱条件的选择选择程序升温可以减少组分重叠和扩展,程序升温起始温度185℃保持10min,升温速率10℃/min、5℃/min、3℃/min3种升温速率,10℃/min时,O,P’-DDT、P,P’-DDD2个异构体不能有效的分离开来。采用5℃/min时,可将这2个异构体分开,但不能完全分离。采用3℃/min时可将它们完全分开但检测时间较长,每检测一份样品约25min。故采用5℃/min升温速率,本方法的分流比1∶60,采用分流进样,可以减少小溶剂峰的拖尾,防止组分峰被掩盖。

　　2.4精密度和准确度试样分别配制浓度为10ug/ml六六六、滴滴涕8种异构体的标准品进行6次测定。样品加标进行4次测定,计算相对标准偏差RSD,从检测结果可见本法的相对标准偏差为1.4～3.0,符合分析要求,其重现性很好。

　　采用加标回收率评价方法的准确度,在样品提取液中分别加入3种浓度的标准,加标回收率范围在94.8%～108%。

　　2.5实际样品的测定本次共检测茶叶样品27份,检测结果:茶叶中六六六含量均低于0.0002mg/kg,DDT含量均低于0.004mg/kg。其中27份样品均都检出P,P’-DDE,含量范围在0.00017mg/kg～0.00099mg/kg±0.00017,均值为0.00046mg/kg。

　　试验结果表明,采用毛细管程序升温气相色谱法测定茶叶中六六六和滴滴涕组分离完全,定量准确,该法是具有较高的精密度和准确度,各组分加标回收率大于94.8%,相对标准差小于3.0%;六六六、滴滴涕的检出限为0.0212ug/g,其中γ-666检出限为10～13g,获得了满意的分析结果。