暗视野显微镜和倒置显微镜的判断

[2013/9/29]

  (一)倒置显微镜

  在细胞培养、组织培养和微生物研究中,常用倒置显微镜进行观测,其光路原理如图3—25所示。柯拉照明系统的光源(1)发出的光线经聚光器(2)后照亮标本(4).3为孔径光闹,(13)则为机场光阔。标本经物镜组(5)、转像系统(6,7,8,9,10,11)后成像在目镜(12)的物方焦平面上,人眼通过目镜组进行观测。为厂观测方便,转像系统的设计应使系统所成的像为完全一致的像。

  照明系统位于载物台(物体)之上,而物镜组则在载物台之下,其相对位置恰好和一般生物显微镜相反,“倒置”二字即内此而得。

  (二)暗视场显微镜

  暗视场显微镜又叫做暗视野显微镜,它与普通明视场显微镜的主要区别是照明方式不同。普通显微镜是让光速透过标本后直接进入物镜,所以视场是明亮的,暗视场显微镜却用强而窄的光束照射标本,而又不让光束直接进人物镜。但由于标本中的微粒能够散射光线,这些散射光中,有一部分能够进人物镜。因此,在黑暗的背景上,能看见标本中微粒的闪烁光点,好僚微粒本身在发光一样。这道理正如一间暗室内,从墙上的小孔射人一束强烈的阳光,能够在光路上看见灰尘的存在一样。这种现象,在光学上称为丁达尔(Tyndall)现象。暗视场显微镜就是根据这一原理设计的。

  普通明视场显微镜,在中心照明的情况下,极限只能分辨0.2μm的细节,但暗视场显微镜可以分辨0.004μm以上的微粒的存在。也就是说,用普通显微镜看不见的微粒,利用暗视场显微镜可以看见。但由于暗现场显微镜是利用被检物体表面散射的光线来观察物体的,因此只能看到物体的外表轮廓和运动状态,而不能辨认其内部结构。