PCR 各种缓冲液的配方

　　PCR 各种缓冲液的配方

　　电泳缓冲液

　　50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液 终浓度配制1L溶液

　　成分 各成分的用量

　　2mol/L Tris碱 242g

　　1mol/L 冰乙酸 57.1 ml

　　EDTA (pH=8.0) 18.622g (200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0))

　　水 补足1L

　　5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液

　　成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量

　　445 mmol/L Tris碱 54g

　　445 mmol/L 硼酸盐 27.5g 硼酸

　　10 mmol/L EDTA 20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)

　　水 补足1L

　　染料

　　1%溴酚蓝(bromophenol blue)

　　加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。

　　1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)

　　溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。

　　10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)

　　小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。

　　凝胶上样液(gel loading solutions)

　　6×碱性凝胶上样液(室温贮存)

　　成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量

　　0.3 N 氢氧化钠 300ul 10N 氢氧化钠

　　6 mmol/L EDTA 120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

　　18%聚蔗糖(400型) 1.8g

　　0.15%溴甲酚绿 15mg

　　0.25%二甲苯青FF 25mg

　　水 补足到10ml

　　6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

　　成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量

　　0.15%溴酚蓝 1.5ml 1%溴酚蓝

　　0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF

　　5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

　　15%聚蔗糖(400型) 1.5g

　　水 补足到10ml

　　6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

　　成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量

　　0.25%溴酚蓝 2.5ml 1%溴酚蓝

　　0.25%二甲苯青FF 2.5ml 1%二甲苯青FF

　　15%聚蔗糖(400型) 1.5g

　　水 补足到10ml

　　6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)

　　成分及 终浓度配制10ml溶液各成分用量

　　0.15%溴酚蓝 1.5ml 1%溴酚蓝

　　0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF

　　5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

　　50%甘油 3ml

　　水 3.9ml

　　6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)

　　成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量

　　0.15%溴酚蓝 1.5ml 1%溴酚蓝

　　0.15%二甲苯青FF 1.5ml 1%二甲苯青FF

　　5 mmol/L EDTA 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

　　40%聚蔗糖 4g

　　水 补足到10ml

　　10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)

　　成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量

　　0.2%溴酚蓝 20mg

　　0.2%二甲苯青FF 20mg

　　200 mmol/L EDTA 4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

　　0.1%SDS 100ul 10% SDS

　　50%甘油 5ml

　　水 补足到10ml