如何正确采集临床微生物学标本

　　正确的微生物学检验始自正确的标本采取。微生物学检验的标准化首先应从标本采取与处理的规范化开始。正确的采取、处理与运送细菌培养标本是临床细菌检验成功的关键。

　　一、血液细菌培养

　　临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血流感染的患者，需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才能进行有效的抗菌治疗，提高治愈率和降低医疗费用。

　　1、采血时机：应在用抗菌素治疗前，最好在患者发冷发热前半小时采血为宜。

　　2、采血次数与间隔

　　(1)急性感染患者：从两臂分别采2份血样。

　　(2)感染性心内膜炎患者：24h内采血3次，每次间隔不少于30分钟。

　　(3)发热原因不明患者：24~48h后可再采血2次,间隔不少于60分钟。

　　3、采血部位：多次采血时，应在不同部位进行。

　　4、采血量：成年人采血量为10ml，新生儿与婴幼儿为1~2ml。每增加1ml血量平均提高阳性率3.2%。

　　5、抗凝剂：0.025~0.05%聚茴香脑磺酸钠(sodium polyanethol sulfonate，SPS)。SPS具有抗凝抗吞噬抗补体及拮抗某些抗生素的作用。

　　6、培养条件：视患者的感染、用药情况选用不同的培养瓶。

　　二、胸腹水及脑脊液标本

　　1、采集：以无菌手续穿刺抽取，为防止凝固可直接注入培养瓶内。

　　2、运送：用带盖的无菌容器送检。

　　3、培养：接种前应离心或做增菌培养。

　　三、尿液标本

　　1、标本采集：应在用药前或停药5天后留取标本，并使尿液在膀胱内停留6-8h以上(给细菌足够的繁殖时间)。

　　(1)清洁排尿法：冲洗尿道口后用无菌容器留取中段尿送检。

　　(2)膀胱穿刺法：此法是收集尿液的最好方法，尤其对厌氧菌检查。

　　(3)肾盂尿采集法：应请泌尿科医生采取，左右侧的标本要标记明确。

　　(4)留置导管取尿法：应穿刺导尿管壁抽取尿液。

　　结核分枝杆菌的检查，应留取24小时尿;检测衣原体时，尿液标本不能代替尿(阴)道分泌物;巨细胞病毒的检测，需多次检测标本，因其释放是周期性的。

　　2、标本的运送和保存：用无菌带螺帽的容器盛标本，标本应在1小时内送检。

　　四、痰标本：标本留取质量的好坏直接影响到对下呼吸道病原学的诊断，导致抗菌治疗失败,以及造成耐药菌的出现。

　　1、标本采集：应在用药前或停药1天后留取标本。

　　(1)自然咳痰：要求患者留痰前用清水漱口3次，用力咳出。首先用灭菌生理盐水将痰液洗3次，然后将痰块打碎，制成悬液后再接种。

　　(2)气管穿刺法：适用于昏迷患者。

　　(3)纤维支气管镜抽取法：适用于纤维支气管镜检查或治疗的患者。

　　(4)胃液抽取法：适用于婴幼儿患者。

　　五、咽拭子

　　1、拭子的选择：要求无菌、不含抑制剂;

　　2、预先沾湿拭子;

　　3、直取感染部位，减少污染。

　　六、生殖道标本

　　1、男性患者：

　　(1)尿道标本：清洗龟头,用碘伏等消毒后,挤出分泌物或以专用细拭子插入尿道口旋转采取分泌物送检。

　　(2)前列腺标本：应由医师按摩前列腺,以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检。

　　2、女性患者：(1)成年患者：应在扩阴器的支持下，以无菌棉拭子取分泌物送检。

　　(2)未成年患者：不应使用扩阴器，应以无菌拭子在阴道口处采取分泌物送检。

　　七、厌氧菌检查

　　厌氧菌是人体许多部位(如皮肤、口咽部、肠道和泌尿生殖道)正常菌群中的一部分，因此下列材料无需做厌氧菌培养：(1)咽、鼻、尿道或直肠拭子。(2)咳出的痰，通过支气管镜取的分泌物，排出或导出的尿、粪及胃内容物。

　　1、正确地选择标本：为排除或尽量减少正常菌群中厌氧菌的污染，用注射器抽取标本比用拭子更好，特别适用于下列临床情况：

　　(1)从未开放的脓肿抽取脓液。

　　(2)通过胸腔穿刺抽出的胸腔液。

　　(3)从耻骨联合上方做膀胱穿刺吸出或从肾造口管收集的尿。

　　(4)气管切开吸取的肺分泌物。

　　(5)穿刺抽出的腹腔液。

　　(6)通过腰椎穿刺抽出的脑脊液。

　　(7)窦道标本可插入小导管用注射器吸出，注射器和针头内的气体应全部排出，将其内容物直接注入一个已排出气的无菌试管内。也可自窦道损伤部位取材做活组织检查。如果必须使用拭子，应尽快接种于适宜的培养基中。

　　2、正确地运送厌氧菌标本：临床标本一旦离开人体部位，在进入厌氧环境前，必须防止大气中氧的毒性作用。应及时将取材的拭子、塑料导管内的少量液体、吸入注射器的标本装入厌氧生物袋或管，在运送过程中要保持厌氧状态。培养基内不应含有肝素，因它会抑制细菌生长。

　　八、脑膜炎奈瑟菌的检查

　　根据病期不同，采集的标本也有所不同。菌血症期病人可采取血液;出现出血点或瘀斑者，可挑取瘀斑渗出液;如出现脑脊髓膜刺激症状者，必要时可抽取脑脊液;上呼吸道感染期的疑似病人和带菌者，可取鼻咽腔分泌物进行检查。因该菌易自溶，故应立即送检，最好在床边接种。

　　九、支原体及衣原体检查

　　支原体和衣原体主要在人的泌尿生殖道的上皮细胞内生长，应该以专用棉拭子采取标本。尿标本应离心取沉淀。

　　十、粪便标本

　　1、标本采集：应在发病早期并且尽量在用抗生素治疗前采集，稀便不少于1ml，固体便不少于1克，无便患者可用直肠拭子采集标本。

　　2、显微镜检查：粪便直接涂片革兰染色，可作为艰难梭菌、弧菌、弯曲菌、葡萄球菌、念珠菌等的初步筛查，更能作为菌群失调的直观判断。