Western Blot哪种染色好？

　　蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。Western Blot哪种染色好？您可知道？广州市深华生物技术有限公司为您最新解析：

　　（1）阴离子染料是最常用的，特别是氨基黑，脱色快，背景低检测极限可达到1.5μg，考马虽然与氨基黑有相同的灵敏度，但脱色慢，背景高。丽春红s和快绿在检测后容易从蛋白质中除去，以便进行随后的氨基酸分析。缺点是溶剂系统的甲醇会引起硝化纤维素膜的皱缩或破坏。不能用于正电荷的膜。灵敏度低。
　　（2）胶体金，灵敏度高，检测范围可到pg级，但染色比稳定。
　　（3）生物素化灵敏度位于1、2之间，可用于任何一种膜。

　　Western Blot显色的方法主要有以下几种：
　　i. 放射自显影
　　ii. 底物化学发光ECL
　　iii. 底物荧光ECF
　　iv. 底物DAB呈色
　　现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理如下（二抗用HRP标记）：反应底物为过氧化物+鲁米诺，如遇到HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。

　　值得一提的是，western blot 这个名称的由来很有意思。最开始做印迹工作的是一个叫做Southern的科学家，但印迹的对象是DNA链，他把这种技术称为Southern blot，后来类似的出现了两个过程相似，但是对象不同的印迹方法，一个针对RNA，一个针对蛋白质，人们分别把这两种技术称为Northern和Western，与这两个技术的发明人没有关系了。