紫外分光光度计组成部件以及测定步骤

　　一、紫外分光光度计作用和组成部件
　　许多有机化合物在紫外区具有特征的吸收光谱，因此可用紫外分光光度法对有机物质进行定性鉴定，结构分析及定量测定．紫外分光光度法定量测定的依据是比耳定律。首先确定化合物的紫外吸收光谱，确定最大吸收波长。在选定的波长下，作出化合物溶液的工作曲线，根据在相同条件下测得待测液的吸光度值来确定待测液中化合物的含量。凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物，根据在特定吸收波长处所测得的吸收度，可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。可见-紫外分光光度计。其应用波长范围为200～400nm的紫外光区、400～850nm的可见光区。紫外分光光度计主要由辐射源（光源）、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。

　　二、手动紫外分光光度计与自动紫外分光光度计的区别
　　手动紫外分光光度计是带刻度盘显示波长的，只能用手动调节波长大小。
　　自动紫外分光光度计是LCD或LED显示波长的，通过设置键选择需要的波长，再有马达传动走到设置的波长。

　　三、紫外分光光度计测定样品步骤
　　1、首先，知道所需要测量物质的特征吸收波长是多少，这个可在国家标准、行业标准或其他相关标准或方法。例如测量总氮的话，就需要220和275nm这2个波长，所以必须买紫外的光度计，并且最好带双波长测定功能，例如测总磷是697nm，只需买台可见光度计就可以了。
　　2、第二步：知道所测量的物质的实验方法，需要哪些仪器和设备，还有玻璃器皿等，同时还有比较完成测量所需要的所有化学试剂等。这个可以在标准或实验方法中找到，基本在互联网上都可以找到电子版的测量方法。
　　3、第三步：配置好所需测量物质的标准浓度溶液，一般是5~8个标准溶液，浓度建议从高到低，建议每个不同浓度贴上标签，以防顺序搞错。注意，部分实验需要往标准溶液中加显色剂之后才可以用光度计进行测量。
　　4、第四步：设置好光度计的测量波长，这就需要熟悉光度计的基本操作，一般测量物质的浓度都是用的标准曲线法，就是对应光度计中的定量测量功能。具体操作时第一步，把仪器的波长调整到我们所需要的波长，例如测量总磷直接把波长走到697nm，之后放入装好蒸馏水的比色皿到样品室做空白，就是熟称的调零。第三部把标准溶液放入样品室，依次测量他们的吸光度，仪器一般会自动记录之后就会给出标准曲线方程，实验完毕。如果仪器不能直接记录吸光度，可以先记在笔记本上，之后用excel软件进行计算标准曲线。判断做出的标准曲线是否能用，看哪个R值即那个相关系数，一般最少做出0.999就可以用了，差一点的仪器也可以做出0.99.
　　5、第五步：把未知样品放入样品室就可以直接测量出样品浓度。

　　四、紫外分光光度计连续测量一个样品，没拿出来出现吸收值下降原因
　　这是由于开始外壁上的溶液没有擦干净，需检查一下仪器是否稳定，是否存在仪器造成的基线漂移，如果是同一个比色皿没有更换待测样品溶液的话，便是仪器的问题，如果波动范围为千分之几的波动误差，大可以忽略不计。另外，可在此波长下，用纯水连续多次测定来观测机器的稳定性。有可能是仪器不太稳定：1.仪器没有事先预热，不稳定；2.光源已经不行啦；3.聚集体随着时间分解了，感觉不对路两种可能：氘灯寿命出了问题；重新放入的样如果不是一个容量瓶的话，建议做下溶液稳定性试验考虑是否是检测器的问题，当拿出样品打开盖光源遮住。