台式高分辨率质谱系统快速鉴定药物杂质

前言

杂质分析对于药物的研发至关重要1。在研究过程中，杂质谱信息能帮助药物化学家优化合成路线和避免潜在的有毒杂质。在开发过程中，当大量母体化合物存在时，鉴定和表征痕量杂质至关重要，从而促进了高分辨率、高灵敏度和高扫描速度的HR-MS 仪器和智能化结构鉴定软件的发展。

 

为了展示HR-MS 在杂质分析和结构鉴定方面的能力，本文选用了市售药物奥美拉唑。本研究采用了赛默飞世尔科技的Q Exactive 台式Orbitrap 质谱仪和数据处理软件Mass Frontier 来快速分析和鉴定奥美拉唑中杂质的结构。

 

方法

材料与试剂

奥美拉唑（CAS# 73590-58-6）购自Sigma-Aldrich，产品号O104-100MG。

乙腈和水来自Fisher Scientific

乙酸铵购自Sigma-Aldrich，产品号73594-25G-F。

甲酸购自Sigma-Aldrich，产品号33015-500ml。

 

样品前处理

奥美拉唑溶液（0.5 mg/mL）配制在1:1 乙腈/ 水混合溶剂中。

 

HPLC 方法

色谱分离采用Ultimate3000 UHPLC 系统。

色谱柱：Hypersil GOLD 柱，2.1mm×150mm，粒径3 μm.

柱温：35 ℃，流速：0.5 mL/min，进样体积：8 μL

流动相：A - 水；B - 乙腈；C -100 mM 乙酸铵，用乙酸调节pH 值到5

 

质谱方法

质谱分析采用 Q Exactive 质谱仪的电喷雾正离子模式。在70,000 和 35,000 分辨率FWHM@m/z 200 下分别采集高分辨全扫描一级质谱数据和数据依赖Top3 二级质谱数据。

 

离子源条件：

离子化模式：正离子ESI

离子源：HESI-II

鞘气流速：45 单位N2

辅助气流速：10 单位N2

喷雾电压（KV）：+3.5

毛细管柱温度（℃）：320

S-lens RF 水平：50.0

加热器温度（℃）：400

 

Q Exactive 方法参数：

AGC 目标（全扫描）：3e6

AGC 目标（MS/MS）：1e5

NCE：30，35% 阶梯变化

扫描范围（全扫描MS）：180 到1200 amu