细胞培养的注意事项

养好细胞注意点

（一）冷冻管应如何解冻 

取出冷冻管后，须立即放入37 ℃ 水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管的爆裂。

（二）细胞冷冻管解冻培养时，DMSO如何处理

在细胞解冻之后，可直接离心去除DMSO，用新鲜的培养基悬浮后直接放入含有 新鲜培养基的培养角瓶中进行细胞培养，如此可避免解冻后细胞生长受到DMSO影响。

（三）可否使用与原先培养条件不同的培养基

每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供培养条件不同的培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活，不应该马上替换。

（四）可否使用与原先培养条件不同的血清种类

 血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

（五）何谓 FBS，FCS，CS，HS

FBS （fetal bovine serum） 和 FCS （fetal calf serum） 是相同的意思，两者都是指胎牛血清。CS （calf serum） 则是指小牛血清。HS （horseserum） 则是指马血清。

（六）培养细胞时应使用 5% 或 10% CO₂

一般培养基中大都使用 HCO₃^-/CO₃^2-/H⁺ 作为 pH 的缓冲系统，而培养基中 NaHCO₃ 的含量将决定细胞培养时应使用的 CO₂ 浓度。理论当培养基中 NaHCO₃ 含量为每公升 3.7 g 时，细胞培养时应使用 10% CO₂；当培养基中 NaHCO₃ 为每公升 1.5 g 时，则应使用 5% CO₂ 培养细胞。