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干货!酶标仪基本知识及其注意事项
[2019/7/12]
酶标仪(MicroplateReader)是对酶联免疫检测(EIA)实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的,反应结果以颜色显示,通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。
酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中,特别在近几年中,由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用,使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛,同时促进了生殖健康技术水平提高。
目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目,如:乙肝五项、爱滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法,报出的结果缺乏科学的依据。例如:某弓形虫检测试剂盒中,临界值规定为:阴性对照品的OD值×2.5,通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行,但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。
国内多家权威机构,如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性,并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读,酶免试剂的质控也应使用酶标仪,并提供酶标仪测定的原始数据,而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变(如:肝炎、爱滋病、优生优育等),判读更要求严谨,由误诊引起的纠纷很难处理。另外,住院手术病人术前的丙肝、爱滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段,正逐渐被许多单位所采用。
酶标仪的使用注意事项
1、工作环境
酶标仪是一种精密的光学仪器,因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性,还能够延长其使用寿命。根据DINVDE0871条例,仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。依据DIN45635-19条例:
仪器应放置在低于40分贝的环境下。
为延缓光学部件的老化,应避免阳光直射。
操作时环境温度应在15℃-40℃之间,环境湿度在15%-85%之间。
操作电压应保持稳定。
操作环境空气清洁,避免水汽,烟尘。
保持干燥、干净、水平的工作台面,以及足够的操作空间。
2、操作注意事项
酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果,因此要得到准确结果,试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯,会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项:
使用加液器加液,加液头不能混用。
洗板要洗干净。如果条件允许,使用洗板机洗板,避免交叉污染。
严格按照试剂盒的说明书操作,反应时间准确。
在测量过程中,请勿碰酶标板,以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。
请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部,操作完成后请洗手。
如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害,请严格按照试 剂盒的操作说明,以防对操作人员造成损害。
如果仪器接触过污染性或传染性物品,请进行清洗和消毒。
不要在测量过程中关闭电源。
对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差,应根据实际情况及时修改参数,以达到最佳效果。
使用后盖好防尘罩。