CAR-T生产工艺优化 | 赛多利斯与艺妙神州联合专访

4月16日-17日，赛多利斯集团旗下赛多利斯斯泰帝（Sartorius Stedim Biotech）与北京艺妙神州医药科技有限公司双方高层相聚在上海举办的CAR-T细胞治疗研发及生产工艺论坛，就CAR-T生产工艺的优化，及CAR-T研究的新进展等问题展开讨论。

赛多利斯与艺妙神州于2018年11月共同建立“联合实验室”，致力于将基因细胞药物应用于恶性肿瘤治疗。论坛中小编有幸对赛多利斯与艺妙神州进行了联合专访。以下为采访的主要内容：

Q：艺妙神州创办至今在不断摸索建立CAR-T细胞的生产流程，可否与我们分享下工艺优化及放大上的难点及心得体会。

A（何霆博士）：整个CAR-T工艺是比较复杂的，艺妙神州初期建立了实验室级的生产工艺，过程中也在不断优化，现在已进入临床级的生产阶段。工艺中确实有很多难点，首先就是慢病毒的生产，如何实现高效的生产慢病毒，并实现慢病毒生产工艺的稳定放大，是行业普遍面临的难点。现阶段生产慢病毒，多数采用贴壁的方式进行细胞培养，贴壁培养的scale-up挑战很大，另外，在贴壁培养过程中，需要添加血清，血清的来源以及血清残留都需要考虑。另外在T细胞的扩增培养阶段也有一些难点，缩短T细胞扩增时间，提高T细胞的阳性率，为病人争取宝贵的时间，是每个CAR-T企业努力的目标。

Q：赛多利斯在CAR-T生产工艺环节有独特的设计理念及硬件设备？

A（沈亮博士）：ICH和FDA都在提倡质量源于设计应用在药物的开发和生产中，其中很重要的一个方面是我们在开发工艺的同时要保证整个工艺的稳健性。我们不仅是设备供应商，同时也为客户提供解决方案，比如在高通量筛选、硬件软件结合用于工艺开发、工艺表征、工艺监控等方面，为客户的生产工艺稳健性提供支持。在CAR-T方面会与客户保持多方面的探讨，比如在CAR-T生产过程中会跟客户一起合作对贴壁细胞进行悬浮驯化工艺开发，也会采用我们的ambr®高通量平台工具。此外，赛多利斯提供的工艺设备能实现从实验室小试到GMP生产的线性放大，在包膜病毒类的病毒计数仪能在数分钟内完成定量检测，在细胞培养、分离纯化和一次性流体管理等产品应用都有很好的数据和应用案例来支持。同时赛多利斯提供的解决方案也包含了从风险评估、试验设计（DoE）、设计空间和操作空间等方面给予客户比较完善的应用支持。这些方面都大大节省了客户的时间和成本投入。

Q：2018年，艺妙神州与赛多利斯合作成立了“联合实验室”。为何会选择赛多利斯作为合作伙伴？

A（何霆博士）：艺妙神州非常荣幸能够选择国际上领先的供应商赛多利斯作为合作伙伴，我们最看重的有几点：一是拥有生物制药行业从上游到下游的完整解决方案，赛多利斯作为上游和一次性使用产品领导者，具有丰富的产品线和高品质的产品质量；其次是赛多利斯有着跟全球制药企业合作的丰富的经验，贯穿整个药物周期，能够给到我们企业很好的具有建设性的建议和帮助；三是赛多利斯的服务理念，设备样品的支持以及技术的支持都是及时高效的，质量源于设计的理念贯穿在我们质粒与病毒工艺开发中。

Q：公司目前的靶点CD19、BCMA和CD123，在国内外都有同行在做，艺妙神州选择这些靶点的原因，以及自身有哪些优势？在新的产品探索上，我们注意到最近与和铂的转基因小鼠平台合作，未来的管线会扩展哪类的靶点，或者哪些新的适应症？

A（何霆博士）：研究最快的是CD19，确实国外的产品已经上市，但在CAR-T这个领域，同样的靶点还是有很大的机会，我们设计的胞内段和胞外段抗体结构都与其他产品存在区别，在适应症上也可以有一些区别，有的整个工艺中，成本较高，国内患者接受不了，我们在生产的过程中，生产成本较低，产品疗效好，将来在市场上也会有较大的竞争力。除了CD19 之外，我们也在探索一些新的靶点，用于实体瘤的治疗。未来有新的进展会与大家分享。

Q：FDA、NMPA对CAR-T细胞生产的核心要求是什么？赛多利斯的解决方案和技术如何帮助客户满足这些要求？

A（沈亮博士）：技术应用的目标是保障客户工艺的稳健性。通过质量源于设计的实施，来保证工艺的稳健性。这种实施是基于科学与风险评估的方案设计，结合平台技术，找到设计空间，保证从质粒到病毒再到T细胞的工艺稳健性。赛多利斯的产品在CAR-T行业的应用覆盖从小试开发到商业化生产整个阶段，解决方案完全符合相关法规要求。我们的风险评估、DoE、设计空间、多变量数据分析是一起推进并整合在工艺中，在此基础上，客户还期望提高样品与PoC检测的效率，而赛多利斯的VirusCounter病毒计数仪， 可以做到一分钟之内做到定量分析病毒载体，缩短了工艺上一些常规项目的检测时间。我们也对比了这种新技术与传统病毒检测技术，保障数据的真实、有效、可靠。

Q：赛多利斯对细胞治疗这个行业的发展会是怎样？有哪些挑战？ 

A（沈亮博士）：随着技术的突破以及资金的青睐，国内细胞治疗治疗行业发展迅猛，市场发展，挑战不断，目前企业都不具备大规模生产能力。在推进产业化的过程中，整个行业都一个面对一些问题，如何防止交叉污染，如何看待生物安全，如何让生产工艺高效，快速占领先机？一次性、封闭式、自动化是未来细胞/基因治疗的发展趋势。

1. 一次性，由于一次性技术具有快速灵活的优势、占地面积小、生产灵活度高，尤其对于生产品种较多的企业，使用一次性系统可以实现共线并存。

2. 封闭式：基因/细胞治疗会用到病毒载体，非封闭式的操作会对操作人员和环境造成生物安全风险，这些工艺通常是2级生物安全等级，从生物安全的角度来看，封闭式的工艺是病毒载体以及和后续细胞工艺阶段的最好的方案，赛多利斯针对质粒与病毒性载体工艺步骤可以一次性封闭式的GMP生产方案。

3. 自动化：由于治疗性免疫细胞产品无法做除菌过滤、一次性、封闭式、自动化的工艺更为重要，包括T细胞的分离、纯化、激活、转导、扩增培养、洗涤等步骤，实现免疫细胞分离流程自动化、模块化、一次性耗材使用，可以防止最终产品的交叉污染，提高生产效率，赛多利斯专用于T细胞扩增培养BIOSTAT® RM TX 可轻松实现连接上下游工艺，在线细胞分析BioPAT® ViaMass，可在线分析细胞密度，减少频繁取样分析操作。

另外平台化能很好的节省客户的成本，我们的平台化方案解决方案在全球有足够的资源和新技术研发投入。能够将新技术新方案及时服务于客户。