生物化学实验常用试剂的配制方法

　　生物化学实验常用试剂的配制方法

　　1、0.5mol/L氢氧化钠溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。 2.用去离子水溶解并稀释至2L。

　　2、0.5mol/L盐酸溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。 2.用去离子水稀释至2L。

　　3、含 0.5mol/L氯化钠的 0.5mol/L氢氧化钠溶液 □组份浓度 0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠 □配制量 1L □配置方法 1.准确量取氯化钠29.3g。 2.准确量取氢氧化钠20g。 3.用去离子水稀释至1L。 注意：此溶液供回收纤维素时使用。

　　4、0.2%葡萄糖标准溶液 □组份浓度 0.2% □配制量 1L □配置方法 1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中，在70℃干燥2小时。 2.干燥器中冷却至室温，重复干燥，冷却至恒重。 3.准确称取葡萄糖2.000g。 4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。

　　5、250μg/mL牛血清白蛋白标准液 □组份浓度 250μg/mL □配制量 2L □配置方法 1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。 2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。 3.4℃保存。

　　6、Folin试剂甲 □配置方法 1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中，加入50g无水碳酸钠，溶解，待用。2.称取0.5g酒石酸钾钠，溶于80mL去离子水中，加入0.25g硫酸铜•5水，溶解。3.将1：2：去离子水按20：4：1的比例混合即可。 4. 4℃保存，可用一周。

　　7、Folin试剂乙 □配置方法 1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠•2水25.0359g， 钼酸钠•2水6.2526g，去离子水175mL，85%磷酸12.5mL， 浓盐酸25mL，充分混合。 2.回流10小时，再加硫酸锂37.5g，去离子水12.5mL及数滴溴。 3.然后开口沸腾15min，以驱除过量的溴，冷却后定容到250mL。 4.于棕色瓶中保存，可使用多年 注意：上述制备地Folin试剂乙地贮备液浓度一般在2mol/L左 右，几种操作方案都是把Folin试剂乙稀释至1mol/L的 浓度作为应用液，我们这时是把贮备液于使用前稀释18 倍，使之浓度为0.1mol/L略高。这种稀释18倍后的Folin 试剂乙就是上文称之为的“应用液”。Folin试剂乙贮备 液浓度的标定，一般是以酚酞为指示剂。用Folin试剂乙去滴定1mol/L左右的标准氢氧化钠溶液，当溶液颜色由红变为紫灰，再突然变成墨绿即为终点，如果用氢氧化钠去滴定Folin试剂乙，终点不太好掌握，溶液地颜色是由浅黄变为浅绿，再变为灰紫色为终点。

　　8、DNS试剂 (3，5-二硝基水杨酸试剂) □配置方法 1.取3，5-二硝基水杨酸10g，加入2mol/L氢氧化钠溶液200mL。2.将3，5-二硝基水杨酸溶解，然后加入酒石酸钾钠300g。 3. 待其完全溶解，用去离子水稀释至2000mL，棕色瓶保存。

　　9、5%蔗糖溶液 □组份浓度 5% □配制量 1L □配置方法 称取蔗糖50g，用去离子水溶解定容至1L。

　　10、0.1mol/L蔗糖溶液 □组份浓度 0.1mol/L □配制量 1L □配置方法 称取蔗糖34.230g，用去离子水溶解并定容至1L。

　　11、20%乙酸溶液 □组份浓度 20% □配制量 1.2L □配置方法 量取冰乙酸300mL，用去离子水稀释至1200mL。

　　12、30%(W/V)Acrylamide □组份浓度 30%(W/V)Acrylamide 0.05% □配制量 1L □配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中 Acrylamide 290g 、BIS 10g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水，充分搅拌溶解 3.加入去离子水将溶液定容至1L，用0.45μm滤膜滤去杂质。 4.于棕色瓶中4℃保存。 注意：丙稀铣胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。

　　13、40%(W/V)Acrylamide □组份浓度 40%(W/V)Acrylamide 0.05% □配制量 1L □配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中 Acrylamide 380g、BIS 20g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水，充分搅拌溶解 3.加入去离子水将溶液定容至1L，用0.45μm滤膜滤去杂质。 4.于棕色瓶中4℃保存。 注意：丙稀铣胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收， 其作用有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。

　　14、10%(W/V)过硫酸铵 □组份浓度 10%(W/V)过硫酸铵 □配制量 10mL □配置方法 1.称取1g过硫酸铵。 2.加入10mL的去离子水后搅拌溶解。 3.贮存于4℃。 注意：10%过硫酸胺溶液在4℃保存时间可使用2周左右，超过期限会失去催化作用。

　　15、考马斯亮蓝R-250染色液□组份浓度 0.1%(W/V)考马斯亮蓝R-250，25%(V/V)异丙醇， 10%(V/V)冰醋酸 □配制量 1L □配置方法 1.称取1g考马斯亮蓝R-250，置于1L烧杯中。 2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。 3.加入100mL的冰乙醋酸，均匀搅拌。 4.加入650mL的去离子水，均匀搅拌。 5.用滤纸出去颗粒物质后，室温保存。

　　16、考马斯亮蓝染色脱色液 □组份浓度 10%(V/V)醋酸，5%(V/V)乙醇 □配制量 1L □配置方法 1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。 醋酸100mL、 乙醇50mL 、H2O850mL 2.充分混合后使用。

　　17、凝胶固定液 (SDS-PAGE银氨染色用) □组份浓度 50%(V/V)甲醇，10%(V/V)醋酸 □配制量 100L □配置方法 1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。 甲醇500mL 、醋酸 100mL 、H2O 400mL 2.均匀混合后室温保存。

　　18、凝胶处理液 (SDS-PAGE银氨染色用) □组份浓度 50%(V/V)甲醇，10%(V/V)戊二醛 □配制量 1L □配置方法 1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。 甲醇50mL 、 戊二醛 10mL 、H2O 40mL 2. 均匀混合后室温保存。

　　19、凝胶染色液 (SDS-PAGE银氨染色用) □组份浓度 0.4%(W/V)硝酸银，1%(V/V)浓氨水，0.04%(W/V)氢氧化钠 □配制量 100L □配置方法 1.量取下列试剂，加入100～200mL试剂瓶中。 20%硝酸银 2mL 浓氨水 1mL 4%氢氧化钠 1mL H2O 96mL 2.均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈现混浊状，此时应补加浓氨水，直至透明。 3.本染色液应现用现配，不宜保存。

　　20、显影液 (SDS-PAGE银氨染色用) □组份浓度 0.005%(V/V)柠檬酸，0.02%(V/V)甲醛 □配制量 1L □配置方法 1.称取下列试剂，置于1L试剂瓶中。 柠檬酸 50mg 甲醛 0.2mL 2.加入1L去离子水后，摇动混合后溶解。 3.室温保存。

　　21、45%乙醇溶液 □组份浓度 45% □配制量 1L □配置方法 量取无水乙醇450mL，加入去离子水550mL，混匀。

　　22、5%的十二烷基硫酸钠溶液 (W/V) □组份浓度 5% □配制量 0.1L □配置方法 称取5.0g十二烷基硫酸钠，溶于100mL4%的乙醇溶液中。

　　23、三氯甲烷-异戊醇混合试剂 □配置方法 取500mL三氯甲烷试剂，加入21mL异戊醇试剂，混匀。

　　24、1.6%乙醛溶液 □组份浓度 1.6% □配制量 0.1L □配置方法 取47%乙醛3.4mL，用去离子水定容至100mL。

　　25、二苯胺试剂 □配置方法 1.称取二苯胺试剂0.8g，溶解于180mL冰乙酸中， 2.再加入8mL高氯酸混匀。 3. 临用前加入0.8mL 1.6%乙醛溶液。 注意：配制完成后试剂应为无色。

　　26、15%三氯乙酸溶液 □组份浓度 15% □配制量 2L □配置方法 称取三氯乙酸300g，用去离子水溶解定容至2000mL。

　　27、1%谷氨酸溶液 □组份浓度 1% □配制量 0.5L □配置方法 1.称取5g谷氨酸，先用适量得用去离子水溶解。 2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。 3. 最后用去离子水定容至0.5L。

　　28、1%丙酮酸溶液 □组份浓度 1% □配制量 0.5L □配置方法 1.称取5g丙氨酸，先用适量得用去离子水溶解。 2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。 3. 最后用去离子水定容至0.5L。

　　29、0.1%的碳酸氢钾溶液 □组份浓度 0.1% □配制量 0.5L □配置方法 称取碳酸氢钾0.5g，用去离子水溶解定容至0.5L。

　　30、0.05%的碘乙酸溶液 □组份浓度 0.05% □配制量 0.25L □配置方法 称取0.125g碘乙酸，用去离子水溶解定容至0.25L。

　　31、Locke氏溶液 □配制量 2L □配置方法 称取18g氯化钠，0.84g氯化钾，0.48g氯化钙，0.3g碳酸氢钠，2g葡萄糖，用去离子水溶解定容至2000mL。

　　32、0.2mol/L的丁酸溶液 □组份浓度 0.2mol/L □配制量 1L □配置方法 1.量取18mL正丁酸试剂。 2.用1mol/L的氢氧化钠中和。 3.再用去离子水定容至1L。

　　33、0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液 □组份浓度 0.1mol/L □配制量 10L □配置方法 称248.17g硫代硫酸钠，用去离子水溶解并定至10L。

　　34、0.1mol/L的碘溶液 □组份浓度 0.1mol/L □配制量 1L □配置方法 1.称取碘12.7g和碘化钾25g。 2.用去离子水溶解并定容至1L。 3.用0.1mol/L的硫代硫酸钠标定。

　　35、10%氢氧化钠溶液 □组份浓度 10% □配制量 2L □配置方法 称取200g氢氧化钠，用去离子水溶解并定容至2L。

　　36、10%盐酸溶液 □组份浓度 10% □配制量 0.2L □配置方法 量取浓盐酸49.3mL，用去离子水定至0.2mL。

　　37、0.1%标准丙氨酸溶液 □组份浓度 0.1% □配制量 0.5L □配置方法 称取丙氨酸0.5g，用去离子水溶解并定容至0.5mL。

　　38、0.1%标准谷氨酸溶液 □组份浓度 0.1% □配制量 0.5L □配置方法 称取谷氨酸0.5g，用去离子水溶解并定容至500mL。

　　39、0.1%水合茚三酮乙醇溶液 □组份浓度 0.1% □配制量 1L □配置方法 称取1g水合茚三酮试剂，溶于1000mL无水乙醇中。

　　40、酚溶液 □配置方法 在大烧杯中加入80mL去离子水，再加入300g 苯酚，在水 浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解。将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗内，轻轻振荡混合，使其成为乳状液。静止7～10小时，乳状液变成两层透明溶液，下层为被水饱和的酚溶液，放出下层，贮存于棕色瓶中备用。

　　41、0.5%淀粉溶液 □组份浓度 0.5% □配制量 0.1L □配置方法 称取淀粉0.5g，用去离子水溶解定容至0.1L。

　　42、对羟基联苯试剂 □配置方法 称取对羟基联苯1.5g，溶于100mL0.5%氢氧化钠溶液中，配制成1.5%的溶液。若对羟基联苯颜色较深，应用丙酮或无水乙醇重结晶，放置时间较长后，会出项针状结晶，应摇匀后使用。