毒胶囊中铬的测定--分光光度法

　　胶囊通常有硬胶囊和软胶囊之分。硬胶囊又称空心胶囊;软胶囊是成膜材料和内容物同时加工成产品的。

　　硬胶囊根据原材料分，一般包括：明胶胶囊和植物胶囊。明胶胶囊属于两节式胶囊。胶囊的尺寸有多种多样，包括000#、00#、0#--5#=号胶囊。胶囊上还可着色印字，呈现出独特的定制外观。

　　近期的毒胶囊事件中主要就是铬含量超标为主要危害，铬的检测方法如下。

　　铬广泛存在于自然环境中，化妆品中铬的污染来源主要是原材料及水，但水中铬主要是电镀、冶炼、制革，印染、制药等工业废水污染。铬主要以六价和三价两种价态存在。微量的三价铬对人体是必需的，过多时也和六价铬一样对人体有害。一般六价的毒性比三价铬强100倍，更易被人体吸收。化妆品卫生标准规定铬为禁用物质。

　　铬的测定方法有二苯碳酰二肼比色法及原子吸收分光光度法。含量高时还可用容量法测定。

　　(一)二苯碳酰二肼分光光度法1 应用范围本法适用于各类化妆品中铬的测定，最低检测量为0.2ug。若取1.0g样品检测，最低检出浓度为0.2mg/kg。

　　2 原理化妆品中的三价铬用高锰酸钾氧化为六价铬。过量高锰酸钾用亚硝酸钠分解，剩余的亚硝酸钠被尿素分解。澄清溶液在酸性条件下加二苯碳酰二肼显色，测定铬的含量。

　　3试剂3.1铬标准贮备液准确称取2.828g在105℃～110℃干燥2h的重铬酸钾K2Cr2O7(优级纯)溶于200m1纯水中，加1.5m1浓硝酸，用纯水定容至1000ml，此溶液1.00ml相当于1.00ug铬。

　　3.2铬标准溶液取1.00ml铬标准贮备液于容量瓶中用纯水稀释至1000ml此溶液1.00ml相当于1.00ug铬。

　　3.3 1%二苯碳酰二肼溶液[Diphenvlcarbazide，(C6H5NH2)2CO]取二苯碳酰二肼1.0g，加丙酮50ml使溶解。加水使成100ml。

　　3.4 1 1磷酸溶液。

　　3.5 20%尿素溶液。

　　3.6 1 1硫酸溶液。

　　3.7 2%亚硝酸钠溶液。

　　3.8 6%高锰酸钾溶液。

　　3.9 硝酸：优级纯。

　　3.10 硝酸：优级纯。

　　3.11 辛醇。

　　3.12 过氯酸：优级纯。

　　3.13 饱和草酸铵。

　　3.14 1+7硫酸溶液。

　　4 仪器4.1 硬质玻璃消解瓶(管)。

　　4.2 50ml比色管。

　　4.3 瓷坩埚。

　　4.4 箱形电炉。

　　4.5 分光光度计。

　　5 分析步骤5.1样品预处理5.1.1湿式消解法：准确称取1.0～2.0g样品，置于消解瓶中，同时做试剂空白。如为干燥固体样品，可酌加适量的水，使含水约75%以上，加硝酸10～15m1，混合放置，然后徐徐加热。待激烈反应停止并冷却后，加硫酸5～7.5m1，再徐徐加热。如消解过程中有大量气泡可加辛醇2～3滴。溶液如变为暗色时，再加2～3ml硝酸继续加热，至产生三氧化硫白烟而溶液呈现淡黄色或无色时消解完成。若消解不完全可再加少量硝酸及高氯酸1m1，加热以加速消解，消解液冷却后加5ml水及5m1草酸铵溶液，加热至生成三氧化硫白烟为止，冷后加水使成50ml作为待测溶液，同时做试剂空白。

　　5.1.2 干湿消解法：准确称取样品1.0g置于瓷坩埚中在小火上缓缓加热直至碳化。移入箱形电炉中于450～500℃下灰化6h左右，冷却取出。葳灰化不完全可加硝酸溶液2～5ml反复消解直至样液为微黄色或无色，微火浓缩至近干，然后定量转移至50ml具塞比色管中，用水定容至刻度，必要时离心沉淀。同时做试剂空白。

　　5.2 标准曲线5.2.1 吸取铬标准溶液(3.2)0，0.20，0.50，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00ml，分别置于150ml三角瓶中，加纯水至50ml。

　　5.2.2 向标准系列中加0.5ml 1 1硫酸，0.5ml 1 1磷酸及2～3滴6%高锰酸钾溶液.如紫红色消褪则应再加高锰酸钾溶液。各加几粒玻璃珠，加热煮沸，如紫红色消退，需补加高锰酸钾至煮沸后仍需保持紫红色。

　　5.2.3 冷却后向各瓶中加1ml 20%尿素溶液(1)，然后滴加2%亚硝酸钠溶液，每加1滴需充分振摇，直到紫红色刚褪去为止。待瓶中不冒气泡后再将溶液转移到50ml比色管中，用纯水稀释至刻度。

　　5.2.4 向比色管各加入2.5ml 1 7硫酸，0.5ml 1%二苯碳酰二肼，立即摇匀放置10min(2)在波长540nm下用3cm比色皿以纯水作参比测定吸光度值。绘制标准曲线。

　　5.3 测定分别取待测溶液及试剂空白溶液50ml于150ml三角瓶中，调pH为7.0，按5.2.2～5.2.4操作。从标准曲线读取铬的浓度。

　　6 计算c=(A-A0)V/mV1式中：c――化妆品中铬的浓度，µg/g;A――从标准曲线上查得样品管中铬的含量，µg;A0――试剂空白管中铬的含量，µg;m――样品质量，g;V――样品总体积，ml;V1――测定时所取样液量，ml。

　　注解(1)还原过量的高锰酸钾溶液时，应先加尿素溶液，然后再加亚硝酸钠溶液。

　　(2)二苯碳酰二肼与铬反应时温度和放置时间对显色都有影响。 15℃时颜色最稳定，显色后2～3min颜色可达最深， 15min显色稳定，1小时后有明显褪色。

　　(二)火焰原子吸收分光光度法1 应用范围本法适用于化妆品中铬的测定，最低检出浓度为0.lmg/kg。

　　2 原理样品经消解处理后，使铬以离子状态存在于检液中，当检测液中铬离子被原子化后，基态原子吸收来自铬空心阴极灯发出的共振线，其吸收量与样品中铬含量成正比，根据测量被吸收后的谱线强度与标准系列比较进行定量。

　　3 试剂3.1 DDTC溶液：取二乙氨基二硫代甲酸钠(sodium diethvldithiocarbamate， DDTC，[(C2H5)2NCS2Na·3H2O]2g溶于水使成100ml。

　　3.2 10%过硫酸铵溶液。

　　3.3 1 1氨水。

　　3.4 乙酸钠缓冲溶液：取59m1 1mo1/L乙酸和141ml lmo1/L乙酸钠混合，调节pH=5.0。

　　3.5甲基异丁基铜一MIBK。

　　3.6铬标准贮备溶液：见二苯碳酰二肼分光光度法(3.1)。

　　3.7铬标准应用溶液：见二苯碳酰二肼分光光度法(3.2)。

　　4仪器4.1 原子吸收分光光度计及其配件。

　　4.2分液漏斗：125ml分液漏斗。

　　5 分析步骤5.1样品预处理5.1.1湿式消解法：同二苯碳酰二肼分光光度法(5.1.l)。

　　5.1.2干湿消解法：同二苯碳酰二肼分光光度法(5.1.2)。

　　5.2 测定取5.1.1或5.1.2处理的检液置于100ml烧杯中，加10%过硫酸铵5ml后用l+1氨水调节pH为3.0～4.0。加上表面皿，置沸腾水浴中加温15min。冷却后移入125m1分液漏斗中。烧杯用纯水清洗3次，每次用水15m1，洗液并入分液漏斗中。另取铬标准应用液(10µg/ml)O.0，0.50，1.00，5.00，10.00，20.00ml，于分液漏斗中加纯水60ml，分别向标准及样品液中加5ml乙酸钠缓冲液，振摇，加DDTC溶液5ml、MIBK 10ml摇振3min，于暗处静置分层弃去水层，取MIBK溶液于10ml具塞比色管中，如呈混浊以2000r/min之速度离心分离2～3min使澄清后进行测定，以下按原子吸收分光光度法操作。波长在357.9nm处测定吸光度。绘制浓度。吸光度标准曲线，计算样品含量。

　　6 计算C=(A-B)/m式中：c-一化妆品中铬的浓度，?g/g;A――从标准曲线上查得样品中铬的含量， ?g;B――从标准曲线上查得试剂空白铬的含量， ?g;M――样品质量，g。