系列肽的合成或购买

[2014/12/19]

  许多商业性公司可以提供合成肽,或商业化的试剂盒,或用于实验室的合成仪。但都价格昂贵。

  肽链的合成可以采用特制的聚乙烯大头针作支持体的超微量固相多肽合成技术,在塑料微量滴定盒或在纸上进行。系列肽可以直接在固相支持物上用抗体检测,或者从固相支持物上切割下来再进行分析。如果需要的只是对1~2种抗体识别的表位作图,回答“是”或“不是”,那么该系统就已足够,而且十分经济。如果待测抗原是一个实验室中的大项目,建议购买那种具有游离生物素结合的、在生物素和同源肽序列间有4个氨基酸间隙的肽。购买此种肽链一般是lmg,可用于4000 次或更多的检测分析。肽的浓度是经过亲和检测分析的;肽链的纯度也是经过检测的;该肽链具有足够的量可供表面胞质共振分析、亲和柱或作为免疫原用。

  所谓便宜的方法,即固相合成肽链,然后直接分析,但缺少上述灵活性。合成的产物不能直接进行分析,支持物必须经过洗脱以去掉抗体和有关试剂以便再次检测。虽然这样做产物仍然可以检测数次,如果要进行多次检测,则不适用。

  此外,一套系列肽的消耗应当根据整个实验的消耗来计算。虽然购买肽只花6000美元就能合成覆盖400氨基酸的功能区。这些消费并没有包括人力开支和为众多实验提供关键信息的开支。如果同数个实验室同时共用一套肽系列,将能大大减小实验的开销。有关生物素标记肽的检测方法将在下一节阐述。肽链系列与固体支持物结合的方法,同有关的基本操作原则一样,而且一般商品化的产物将会有附带的操作方法。

  肽的合成过程非常适合完全自动控制操作,现在已经有用于肽检测的芯片产品。这样的检测将大大提高肽扫描检测速度和降低成本。经营肽合成的公司应该开发针对某些常用的关键蛋白质抗原低成本的肽扫描试剂盒。